|
|||||||||||||||
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
9: Tyndtlagschromatografi (TLC) af mono - diglycerider
| Anvendelsesområde | Mono- diglycerider | ||||
| Analysetid | Ca. 3 timer. | ||||
| Sikkerhedsforskrifter | Alt arbejde udføres med sikkerhedsbriller | ||||
| Reagenser | TLC plader silica gel 20x20 cm (Merck 5721) eller 10x20 cm (Merck 5626) eller lignende. | ||||
| Elueringsvæske (mobil fase) Prøveopløsningsmiddel Fremkaldervæske |
|||||
| I. Klargøring af TLC-kar | Det rengjorte kar med tætsluttende låg fores med et stykke filtrerpapir. Papiret må ikke kunne berøre TLC pladens Silica-belægning.
Ca. 100 mL mobil fase hældes i karret. |
||||
| II. Opløsning af prøven | Afvej 500 mg prøve i et dramglas med skruelåg og opløs i 5 mL cyklohexan/ethanol 60: 40. Ryst glasset godt, og lad prøven opløse helt. |
||||
| III. Påsætning af prøven: | Med et plastic kapillarrør opsuges ca. 4 μL (~ 1/5 dråbe – prøv dig frem). Prøven påsættes TLC-pladen et par cm oppe. Marker i siden af pladen med en blød blyant hvor prøverne er påsat. Hvis man har en skabelon anvendes denne. |
||||
| IV. Eluering: | Pladen sættes ned i det mættede kar, og låget sættes hurtigst muligt på igen. Elueringstiden er ca. 25 min. Når eluenten er løbet ca. 14 cm fjernes pladen fra karret. Lad pladerne tørre 5 min i stinkskabet. Herefter skal pladerne tørre i ovnen ved 100°C i 30 min. |
||||
| V. Fremkaldelse: | Pladen dyppes i fremkalder-reagenset i 10 sekunder og duppes forsigtigt tør med filtrerpapir. Pladen fremkaldes i ovn ved 100-120°C i 15 minutter, hvorefter den evalueres visuelt i almindeligt lys. |
||||
|
 |
Triglycerid |
|
Diclycerider |
|
|
Monoglycerid |